二手賽默飛 7500 熒光定量 PCR 儀介紹與應(yīng)用解析

一、設(shè)備概述

熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（qPCR）技術(shù)，作為分子生物學(xué)領(lǐng)域的一項重要工具，廣泛應(yīng)用于基因定量、病原體檢測、基因表達分析、轉(zhuǎn)基因檢測以及微生物監(jiān)測等多個領(lǐng)域。賽默飛世爾科技（Thermo Fisher Scientific）推出的 Applied Biosystems 7500 Real-Time PCR System（以下簡稱 7500 系統(tǒng)）是一款經(jīng)典的熒光定量 PCR 平臺，憑借其模塊設(shè)計和兼容性，在多個實驗室工作流程中持續(xù)發(fā)揮作用。

作為一款被廣泛應(yīng)用并已有多年市場歷史的儀器型號，7500 系統(tǒng)的二手市場活躍，越來越多的實驗室基于預(yù)算、維護可持續(xù)性和培訓(xùn)目的考慮，在配置PCR平臺時選擇質(zhì)量良好、功能齊全的二手設(shè)備。

二、設(shè)備結(jié)構(gòu)與核心組成

賽默飛 7500 系統(tǒng)采用封閉式臺式主機結(jié)構(gòu)，由以下幾個主要部分組成：

1. 光學(xué)系統(tǒng)

內(nèi)置 5 色光學(xué)檢測系統(tǒng)，支持多重?zé)晒馔ǖ罊z測，包括 FAM、VIC、ROX、TAMRA、SYBR Green 等常用染料。

• 激發(fā)光源：高亮度 LED

• 檢測器：CCD 相機

• 濾光片組合：固定濾光系統(tǒng)，自動完成多通道讀取

• 優(yōu)點：減少光路移動部件，增強設(shè)備整體穩(wěn)定性和耐用性

2. 熱循環(huán)模塊

采用 Peltier 熱電元件，支持標(biāo)準(zhǔn) 96 孔板（0.2 mL 反應(yīng)體系）

• 升溫速度：約 1.6℃/s

• 溫控精度：±0.25℃

• 溫度均一性：±0.5℃（典型）

• 熱蓋溫度：可調(diào)（默認(rèn) 105℃），用于防止反應(yīng)液揮發(fā)

3. 軟件系統(tǒng)

配套使用 SDS 軟件（v1.4 及以上），具備以下功能：

• 實時擴增曲線繪制

• Ct 值自動計算

• 相對定量/絕對定量分析

• 融解曲線分析（SYBR Green 應(yīng)用）

• 多重反應(yīng)設(shè)置與自動數(shù)據(jù)分組

4. 通信接口

• USB 接口用于數(shù)據(jù)導(dǎo)出

• 可通過串口/局域網(wǎng)連接上位機，實現(xiàn)遠程操作或集群管理（部分版本支持）

三、二手設(shè)備市場背景與應(yīng)用場景

在市場使用年限較長的 PCR 系統(tǒng)中，7500 系列因其功能實用、性能穩(wěn)定而在二手設(shè)備中具有一定保有率。其適用于以下場景：

• 中小型科研實驗室：預(yù)算受限但需要搭建完整分子實驗平臺

• 醫(yī)學(xué)檢驗科室：病原體檢測與基因分型項目需要可快速部署的儀器

• 教學(xué)平臺：高校生命科學(xué)課程實驗實訓(xùn)需求

• 企業(yè)質(zhì)檢與研發(fā)：食品安全、農(nóng)殘檢測、種子檢驗等環(huán)節(jié)的分子檢驗

四、技術(shù)參數(shù)與功能概覽

五、設(shè)備使用流程與操作簡要

1. 樣本準(zhǔn)備與反應(yīng)體系設(shè)定

• 樣本體系通常為 10–25 µL，包括引物、探針、模板 DNA、Master Mix

• 加樣至96孔板后，封板膜密封，避免蒸發(fā)

• 插入熱蓋前確保無氣泡、板底干凈整潔

2. 程序設(shè)置

• 打開軟件，設(shè)置熱循環(huán)參數(shù)、熒光檢測通道、讀取模式（連續(xù)/分段）

• 設(shè)置實驗組與標(biāo)準(zhǔn)曲線/參考樣本位置

3. 數(shù)據(jù)采集

• 實驗過程中實時采集熒光信號

• 系統(tǒng)自動生成擴增曲線、標(biāo)準(zhǔn)曲線、Ct 值等結(jié)果

4. 數(shù)據(jù)分析

• 采用 SDS 軟件進行背景扣除、基線校正、ΔΔCt 法分析等

• 可視化導(dǎo)出結(jié)果，用于報告生成與歸檔管理

六、二手設(shè)備的優(yōu)勢與注意事項

優(yōu)勢

1. 成本降低：較新機購買價格下降明顯，適合預(yù)算有限實驗室

2. 兼容性強：可使用現(xiàn)有 ABI 探針試劑體系，無需額外改造

3. 維修配件豐富：配件供應(yīng)渠道多，維修維護便捷

4. 適配舊軟件：對于依賴舊數(shù)據(jù)體系（如 SDS 1.4）的實驗室，有一定操作連續(xù)性

注意事項

1. 設(shè)備來源確認(rèn)：優(yōu)選來自正規(guī)實驗室或具有完整溯源記錄的設(shè)備

2. 運行時長審查：檢查累計運行時間、熱蓋壽命、光學(xué)系統(tǒng)狀態(tài)

3. 校準(zhǔn)記錄：查看最近一次溫控、光學(xué)系統(tǒng)的校準(zhǔn)與驗證文檔

4. 軟件兼容性：確認(rèn)設(shè)備是否能連接當(dāng)前操作系統(tǒng)版本的計算機

5. 保修與售后：建議與具有技術(shù)支持能力的供應(yīng)商合作，明確責(zé)任界限

七、設(shè)備升級與兼容性擴展

盡管 7500 并非最新型號，但其仍可在一定范圍內(nèi)通過軟件升級、附件配置擴展功能。例如：

• 更換主控電腦：連接 Windows 10 系統(tǒng)的工作站并安裝兼容驅(qū)動

• 軟件升級：部分版本可升級至 SDS v1.5.1，提高兼容性與數(shù)據(jù)處理能力

• 溫控模塊調(diào)校：通過熱循環(huán)模塊溫度校正工具提升熱均一性

此外，對于有特殊需求的實驗室（如要求自動化加樣平臺對接），7500 也可與一些第三方機械臂配合使用，但需額外配置適配接口。

八、常見問題與維護建議

日常維護建議：

• 每次實驗后及時清理熱蓋、樣本殘留

• 每月檢查一次光學(xué)系統(tǒng)與濾光片通透性

• 每季度進行一次熱循環(huán)均一性測試

• 每半年進行溫控校準(zhǔn)與光源強度評估

九、典型應(yīng)用案例

1. 新冠病毒核酸篩查（RT-qPCR）
   2020年以后，許多實驗室使用7500系統(tǒng)搭建核酸篩查平臺，用于E基因、N基因的實時檢測，檢測靈敏度可達10拷貝/反應(yīng)。

2. 教學(xué)科研中的定量PCR教學(xué)實驗
   高校分子生物學(xué)與基因工程課程常用該系統(tǒng)進行SYBR Green基礎(chǔ)實驗教學(xué)，如β-actin、GAPDH等內(nèi)參基因表達定量分析。

3. 臨床樣本基因表達分析
   醫(yī)院檢驗科開展腫瘤標(biāo)志物相關(guān)基因表達研究，利用7500平臺做qPCR前瞻性研究，形成術(shù)后評估模型。

十、結(jié)語

總的來看，Applied Biosystems 7500 熒光定量 PCR 儀雖然已非市場上最新型號，但在功能、兼容性、耐用性以及用戶群體上依然保持穩(wěn)定表現(xiàn)。對于需要搭建經(jīng)濟型分子檢測平臺的實驗室而言，采購經(jīng)過檢測、保養(yǎng)完善的二手 7500 儀器，不失為一種合理的選擇。

在選購過程中，用戶應(yīng)重點關(guān)注設(shè)備來源、使用年限、運行記錄、光學(xué)與溫控系統(tǒng)的當(dāng)前狀態(tài)，以及配套軟件與售后支持等因素，確保設(shè)備投入使用后能持續(xù)提供穩(wěn)定、可靠的數(shù)據(jù)支持。在規(guī)范管理與定期維護的前提下，二手賽默飛7500系統(tǒng)依然能夠在多個應(yīng)用場景中完成多樣化的分子生物學(xué)任務(wù)。