二手賽默飛熒光定量PCR儀QuantStudio 3（Q3）使用價(jià)值與技術(shù)解析

一、引言

熒光定量PCR（qPCR）是一種廣泛應(yīng)用于基因表達(dá)分析、病原體檢測(cè)、SNP 分型、拷貝數(shù)變異（CNV）研究等領(lǐng)域的分子生物學(xué)技術(shù)。美國(guó)賽默飛世爾科技（Thermo Fisher Scientific）旗下的Applied Biosystems（ABI）系列是其中一個(gè)被廣泛使用的qPCR平臺(tái)品牌，其推出的QuantStudio系列因其系統(tǒng)穩(wěn)定性、操作便捷和擴(kuò)展能力等特點(diǎn)，在眾多科研及檢測(cè)機(jī)構(gòu)中得到較多應(yīng)用。

QuantStudio 3（簡(jiǎn)稱(chēng)Q3）是該系列入門(mén)型號(hào)之一。相較于高通量版本如QuantStudio 5/6/7 Pro，Q3定位于常規(guī)科研、教學(xué)實(shí)驗(yàn)室及中等通量需求場(chǎng)所。本文將以二手Q3設(shè)備為研究對(duì)象，從儀器構(gòu)成、運(yùn)行機(jī)制、技術(shù)性能、操作流程、應(yīng)用范圍、數(shù)據(jù)輸出、維護(hù)要點(diǎn)、二手市場(chǎng)價(jià)值、適用實(shí)驗(yàn)場(chǎng)景及采購(gòu)建議等多個(gè)方面進(jìn)行全面介紹，旨在幫助用戶(hù)科學(xué)判斷其在當(dāng)前實(shí)驗(yàn)需求中的適配度。

二、儀器構(gòu)成與基本參數(shù)

1. 主機(jī)結(jié)構(gòu)

QuantStudio 3 qPCR系統(tǒng)整合熱循環(huán)模塊與熒光檢測(cè)光路為一體，采用封閉式光學(xué)系統(tǒng)。其結(jié)構(gòu)緊湊，便于放置于標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)臺(tái)面或生物安全柜中。外殼材質(zhì)為ABS復(fù)合材料，兼具機(jī)械強(qiáng)度與輕便性。主機(jī)頂部為樣品倉(cāng)，配有自動(dòng)加熱蓋；正面嵌入彩色觸控屏用于運(yùn)行設(shè)置和狀態(tài)查看。

2. 熱循環(huán)模塊

• 樣品通量：標(biāo)準(zhǔn)96孔（0.2 mL管或96孔板）

• 升溫速率：約3.0 °C/s

• 降溫速率：約3.0 °C/s

• 溫度均一性：±0.25 °C（30 秒內(nèi)）

• 溫控精度：±0.15 °C

• 加熱蓋溫度：默認(rèn)設(shè)置為105 °C，可調(diào)范圍90–110 °C

3. 光學(xué)檢測(cè)系統(tǒng)

QuantStudio 3 配備6通道光學(xué)檢測(cè)模塊，支持多重?zé)晒馔ǖ啦杉?/p>

ROX通道可用于熒光校正（Passive Reference）。該系統(tǒng)不需用戶(hù)更換濾光片，所有通道在同一次反應(yīng)中可自動(dòng)切換采集。

三、系統(tǒng)軟件與數(shù)據(jù)分析能力

1. 軟件平臺(tái)

QuantStudio 3 配套使用Design & Analysis Software（DA軟件），支持Windows平臺(tái)。用戶(hù)可通過(guò)觸屏或遠(yuǎn)程PC登錄方式進(jìn)行程序設(shè)置與結(jié)果分析。軟件界面圖形化程度較高，便于初學(xué)者快速掌握。

主要功能包括：

• 實(shí)時(shí)熒光曲線顯示

• Ct值自動(dòng)計(jì)算

• 基線和閾值自動(dòng)調(diào)整

• 熔解曲線分析

• 相對(duì)表達(dá)分析（ΔΔCt）

• 絕對(duì)定量分析（標(biāo)準(zhǔn)曲線法）

• 拷貝數(shù)變異分析

• 熒光信號(hào)平滑與背景扣除功能

2. 數(shù)據(jù)導(dǎo)出格式

支持導(dǎo)出結(jié)果至CSV、TXT、PDF、Excel等格式，方便在第三方軟件（如GraphPad Prism、SPSS等）中進(jìn)行后續(xù)統(tǒng)計(jì)分析。也可將原始實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)包（.eds格式）導(dǎo)入更高級(jí)的分析平臺(tái)（如Thermo Cloud）進(jìn)行遠(yuǎn)程存儲(chǔ)和多用戶(hù)協(xié)作。

四、典型應(yīng)用場(chǎng)景

QuantStudio 3 適合下列實(shí)驗(yàn)類(lèi)型：

• 基因表達(dá)定量：相對(duì)定量（如炎癥因子IL-6、TNF-α表達(dá)比較）、絕對(duì)定量（如病毒載量評(píng)估）。

• 突變檢測(cè)與SNP分型：配合探針?lè)ㄗR(shí)別堿基替換，適合小規(guī)模遺傳篩查。

• 微生物與病毒檢測(cè)：在食品安全、臨床分子診斷（如HBV、SARS-CoV-2 qPCR篩查）中可用于常規(guī)陽(yáng)性/陰性判斷。

• 拷貝數(shù)變異（CNV）分析：需配合標(biāo)準(zhǔn)化引物探針庫(kù)。

• 教學(xué)與培訓(xùn)實(shí)驗(yàn)：適合高校生命科學(xué)、醫(yī)學(xué)等專(zhuān)業(yè)教學(xué)平臺(tái)入門(mén)使用。

五、操作流程簡(jiǎn)要

典型qPCR實(shí)驗(yàn)操作流程如下：

1. 模板與反應(yīng)體系準(zhǔn)備：DNA/cDNA樣本、引物、熒光染料或探針，配置總反應(yīng)體系體積（20 µL或25 µL）。

2. 裝板并封板：使用0.2 mL反應(yīng)管或96孔PCR板，封板膜密封，避免蒸發(fā)。

3. 插入儀器并設(shè)定程序：

• 酶激活（95 °C，2–10 min）

• 擴(kuò)增循環(huán)（95 °C 15 s，60 °C 60 s ×40 cycles）

4. 選擇染料、設(shè)置檢測(cè)通道；

5. 開(kāi)始運(yùn)行與實(shí)時(shí)監(jiān)控；

6. 結(jié)果導(dǎo)出與分析：Ct值計(jì)算、圖像保存、熔解曲線判斷。

六、維護(hù)與日常檢查

雖為二手設(shè)備，QuantStudio 3若保養(yǎng)得當(dāng)，其運(yùn)行壽命依然可持續(xù)5–8年。